1.二甲基亚风(DMSO):许多耐热DNA聚合酶厂家推荐在PCR反应中加入10%DMSO,这可能是DMSO有变性DNA的作用。DMSO的使用对大肠杆菌DNA聚合酶I Klenow片段是有益的,但对Taq DNA聚合酶有抑制作用,一般反应中应尽量不用DMSO。不过,在复合PCR中可以用。 2.甘油:有报道,反应中加入5%一20%寸油有助于PCR反应的复性过程,尤其对G十C含量高和二级结构多的靶序列以及扩增长片段(大于l 500bp)更适用。应注意的是,DMSO和甘油并非对所有PCR均有益,因此,是否加这些试剂应根据具体情况而定,也需要操作者的探索。 3.氯化四甲基铵(TMAC): 在反应中加入1x10-4一1x10-5mol/L的TMAC可促进PcR,去除非特异扩增,而不抑制Taq聚合酶。 4.T4噬菌体基因32蛋白质(gp32) :加入0.5—1ul的gp32(1nmol/L,Pharmacia) 可使Taq聚合酶对长片段DNA的扩增改善至少10倍。
5.还有甜菜碱。呵呵。。
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