最近构建的两个突变体, 没有PHENOTYPE, 今天染色结果出来发现好象没有表达.
分析一下可能原因:
基因是否正确. MRNA提取, 酶切位点的设计(基因内有无,酶的BUFFER, DIGEST BIND SITE), 引物, 读玛框GC含量的考虑. 这些连进PMD19T测序,没问题.
连进转录载体. 酶切,RCP鉴定. 明天补做测序. 因为HIS好象没表达, 和CONTROL没区别/
转录.TABLE DETAIL. TEMPLE少? 降解?? 容易堵针, 下次离心.
染色的问题? 如果RNA没问题. 表达了, 染色已经换进口的抗体了. ?? |
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